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一台抵三台,表征不折腾!AFM/SEM/EDS三合一显微镜搞定纳米颗粒全套分析

发布日期:2026-07-01

纳米颗粒尺寸区间为1-500 nm,介于原子尺度与块体材料之间,具有特殊的物化性质,其中10 nm级纳米颗粒兼具稳定的体系行为与极强应用价值,但尺寸低于可见光波长,给精准表征带来了挑战。传统表征方案存在显著短板:光学显微镜受衍射极限限制,仅能粗略分辨亚微米级颗粒,无法区分致密小颗粒团簇与单一大颗粒;单一 SEM 仅可获取形貌与粒径信息,缺失三维表面粗糙度数据;独立 AFM 定位效率极低,难以快速锁定微量待测颗粒;单独 EDS 无法实现形貌与元素组分一一对应。


Quantum Design推出的AFM/SEM/EDS三合一显微镜FusionScope,打破单一表征手段局限,依托共坐标系一体化集成设计,在单台设备内完成纳米颗粒快速定位三维形貌高精度测绘元素组分精准鉴定全链条关联分析,为混合体系、包覆型、生物功能化纳米颗粒提供完整、精准的综合表征解决方案。


图1. FusionScope三合一多功能显微镜

 

由于传统光学器件的衍射极限,光学显微镜仅能对亚微米级纳米颗粒进行粗略定位,且无法可靠地区分大颗粒与紧密排列的小颗粒团簇,如图2(A)所示,小颗粒团簇在光学图像中与单个大颗粒难以区分;而同一区域的SEM图像图2(B)则清晰分辨出各个纳米颗粒,从而能够准确分析团聚行为。


图2:同一区域的(A)光学显微镜图像和(B)SEM图像,黄色箭头指示相同位置,表面光学图像中的小纳米颗粒团簇与大颗粒难以区分。

 

FusionScope:三位一体共平台关联表征

 

FusionScope扫描电子显微镜(SEM)原子力显微镜(AFM)能谱仪(EDS)集成于同一测试平台,三者共享统一坐标体系,无需二次转移样品单次上机即可完成广域筛查-单颗粒精准定位-三维形貌量化-元素组分全套分析,有效适配各类纳米颗粒体系表征需求。


图3显示了在FusionScope中采集的混合氧化铁和金包覆氧化铁纳米颗粒样品的广域SEM图像。广域SEM成像用于快速扫描数百个颗粒,从而能够分析团聚行为,数百微米尺度上的空间分布以及粒径分布。两种纳米颗粒均通过碳二亚胺交联进行了抗体功能化,随后在含0.5% BSA/PBS缓冲液(pH7.4)中与目标抗原孵育,形成抗原-抗体复合物。颗粒洗涤后重悬于磷酸钾缓冲液(0.01%)中,取10-20uL溶液滴加于TEM载网上,室温孵育1小时后进行成像。SEM分析表明,抗体功能化使纯氧化铁颗粒的平均半径从约170nm增加到约240nm,相应的粒径分布如图4(B)和图4(C)所示。


图3:分布在TEM载网上的氧化铁与金包覆氧化铁纳米颗粒混合物的广域SEM图像。


图4:(A)无涂层氧化铁纳米颗粒的SEM图像,红色标记为识别出的颗粒。(B)抗体包被前的半径分布(平均值约170 nm)。(C)抗体包被后的半径分布(平均值约240 nm)。


在混合氧化铁与金包覆氧化铁样品中,SEM成像可将纳米颗粒团簇定位在TEM载网的微孔内。在更高放大倍数下,两种纳米颗粒可通过灰度对比度加以区分(图5(A))。可倾斜样品台与AFM配合,可实现相对于SEM的80°旋转,从而能够观察探针–样品相互作用,并将AFM探针精确定位于载网微孔内。图5(B)显示了AFM探针接触单个纳米颗粒时的状态。


图5:(A)小纳米颗粒团簇的SEM图像,显示金包覆与纯氧化铁纳米颗粒。(B)AFM探针接触纳米颗粒的SEM图像。


FusionScope集成了SEM与AFM,二者共享同一坐标系,因此可实现SEM引导下的AFM探针定位。SEM可识别远超出光学显微镜视野范围的纳米颗粒团簇,从而能够对单个纳米颗粒进行快速AFM扫描,并达到皮米级分辨率(图6(A))。AFM形貌测量还可揭示表面粗糙度与涂层均匀性:纯氧化铁纳米颗粒的均方根粗糙度约为5 nm(图6(B)),而金包覆颗粒则约为20 nm(图6(C))。


图6:(A)单个纯氧化铁纳米颗粒的三维AFM形貌图。(B)纯氧化铁纳米颗粒的RMS粗糙度(约5 nm)。(C)金包覆氧化铁纳米颗粒的RMS粗糙度(约20 nm)。


SEM+AFM 形貌观测仅能通过灰度、粗糙度间接判断颗粒类型,EDS 可提供确凿元素证据,实现形貌与组分关联。将混合纳米颗粒沉积于TEM载网上可最大程度降低背景信号,从而能够对纳米颗粒团簇进行EDS面扫,以区分金包覆颗粒与纯氧化铁颗粒。图7(A)显示了所有检测到的元素,图7(B)突出显示金元素,图7(C)突出显示铁元素。中心颗粒显示出强烈的铁信号而无金信号,表明其为纯氧化铁颗粒;而周围较小的颗粒则显示出金信号及较弱的铁信号,证实其为金包覆氧化铁颗粒。


图7:(A)纳米颗粒团簇的EDS元素分布图,显示C、O、Fe和Au。(B)金元素分布图,显示中心颗粒不含金。(C)铁元素分布图,显示中心颗粒具有较强的铁信号,周围颗粒信号较弱。


FusionScope将SEM、AFM和EDS集成于单一关联分析平台,可实现全面的纳米颗粒表征。广域SEM成像可识别团簇与单个纳米颗粒AFM提供尺寸、形貌和表面形貌的精确测量,EDS则揭示元素组成与涂层信息。由于三种技术共享同一坐标系,因此可对同一纳米颗粒进行关联测量(图8),从而在单台系统内实现对颗粒尺寸、分布、粗糙度和成分的可信综合分析。


图8:在FusionScope中对同一纳米颗粒团簇采集的SEM(A)、AFM(B)和EDS(C)图像。

 

样机体验:

 

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